H7N9 禽流感病毒属于甲型流感病毒的一个高致病性亚型病毒，其宿主范围广泛，对比 H5N1 病毒，其扩散性更强而迅速，可感染野生禽类、家禽、人或其他哺乳动物，严重威胁人类健康和社会稳定，造成巨大的经济损失。H7N9 的传播途径主要有 2 种：一种是与病鸡直接接触；另一种是与病鸡污染物接触。健康鸡可通过呼吸道、消化道、皮肤创伤及眼结膜感染该病毒而引起发病，禽流感潜伏期从几小时到几天不等，其长短与病毒的致病性、感染剂量、感染途径和被感染鸡的品种有关。
笔者所在地区属于梅州市梅县区，地势四周高、中间低，全区丘陵地占 80%。随着市场经济的不断发展，农村养鸡专业户作为畜牧业的重要补充，小型养鸡业的短、平、快特点，很快被我区广大农民所接受，养鸡业出现了令人振奋的发展势头。据统计，梅县区 2016年养殖数量达 2 000 只鸡以上的养殖户有 295 户，存栏数达到 221.7万只以上，出栏数达到 498.5 只以上，全年共注射高致病性禽流感疫苗 905 万羽次。根据我国《动物防疫法》及相关法律规定，对高致病性禽流感 H7N9 实行强制免疫。免疫目前已成为广大专业户的共识，但免疫效果需要监测数据说明。本试验使用高致病性禽流感 H7N9亚型疫苗对两个养鸡场的鸡群进行免疫后，依托本区动物卫生监督所兽医实验室，依据高致病性禽流感诊断技术（GB/T18936-2003.3），测定禽流感 H7 抗体，根据鸡群在免疫高致病性禽流感 H7 亚型疫苗前后抗体的变化，以期有效掌握免疫效果和疫病动态。
1、材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
在同一个镇选取相隔 15 km 的 2 个养鸡场（石扇养鸡场和城东养鸡场）。这 2 个养鸡场规模相当，存栏数量均在 3 000 只左右，所养雏鸡从广东广源鸡苗销售服务中心购进。选取石扇养鸡场 10 日龄土黄鸡、城东养鸡场 10 日龄清远麻鸡各 600 只作为试验对象，试验前鸡只均未进行过此疫苗免疫。每次抗体监测时随机采血 100 份。
1.1.2 疫苗
重组禽流感病毒灭活疫苗（H7N9 亚型、Re-6 株），由乾元浩生物股份有限公司郑州生物药厂生产（生产批号 2016095）。
1.1.3 标准试剂
禽流感 H7N9 抗原、禽流感 H7N9 阳性血清、禽流感 H7N9 阴性血清，检测试剂厂家为哈尔滨维科生物技术开发有限公司（生产批号为 2016005）。
1.2 试验方法
1.2.1 雏鸡母源抗体测定
对 2 个养鸡场的 10 日龄雏鸡采血各 98 份，检测母源抗体（禽流感 H7 抗体）。
1.2.2 免疫后抗体消长规律分析
首次免疫时间为 10 日龄，第 2 次免疫时间为 40 日龄，肌注高致病性禽流感疫苗 0.3 mL/ 只，分别于 20、30、40、50 和 60 日龄采血检测禽流感 H7 抗体。
1.2.3 血凝抑制试验
参照《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T18936-2003.3）的规定，将上述血样及时分离血清，采用血凝抑制（HI）试验，集中对血清样品进行禽流感 H7 抗体检测。
2、结果与分析
2.1 雏鸡母源抗体情况
从表 1 可知，鸡高致病性禽流感母源抗体在鸡 10 日龄时已基本为 0，母源抗体对免疫已不造成影响。
2.2 免疫后抗体消长规律分析
本试验对鸡首次接种高致病性禽流感疫苗10 天后（20 日龄）、20 天后（30 日龄）、30 天后（40 日龄）以及鸡第 2 次接种高致病性禽流感疫苗 10 天后（50 日龄）、20 天后（60 日龄）的样本开展采样检测，对鸡群免疫后抗体消长规律进行研究。结果（表 1）表明，在首次免疫后 10天能检测到抗体，但免疫抗体普遍不高；首次免疫后 20 天时抗体较高，全群免疫合格率达 90%以上；首次免疫后 30 天时抗体仍较高，全群免疫合格率达 90%以上。鸡在第 2 次免疫后 10 天时抗体较高，全群免疫合格率达 95%以上；第 2次免疫后 20 天时抗体较高，全群免疫合格率达100%。
3、结论与讨论
从以上免疫后抗体消长规律可知，鸡在首免 20 天后其抗体达到较高的峰值，免疫抗体合格率达到 90%以上，而二免后 20 天其抗体达到较高水平，免疫抗体合格率达到 100%。试验证明，疫苗合格有效，免疫疫苗对鸡群有较好的保护，即使只进行 1 次免疫，免疫抗体合格率也能达到 90%以上，如果有条件的鸡场能对鸡群进行第 2 次加强免疫，免疫抗体合格率能达到100%。
根据母源抗体、首免、二免抗体变化规律，确定鸡高致病性禽流感免疫程序为：10 日龄时用高致病性禽流感疫苗进行首次免疫，胸部肌注，剂量为 0.3mL/ 只；40 日龄进行第 2 次免疫，肌注，剂量为 0.3mL/ 只。
我区动物防疫工作人员在禽流感病毒高发的春秋两季为全区所有鸡群注射疫苗，以此防止禽流感发生。今年以来我区对鸡禽流感抗体抽检了 405 份，阳性率达到 93%，有效掌握了免疫效果和疫病动态。
作者：谢竞琇,谢碧闻,刘丹(广东省梅州市梅县区动物卫生监督所，广东梅州514700)
责任编辑：曹伟胜
