马立克氏病（MD）是鸡常见的淋巴细胞增生性、传染性疫病，通常以外周神经和包括虹膜、皮肤在内的其他各种器官和组织的单细胞浸润为特征。在使用疫苗前，MD 对养禽业构成严重的经济危害，产蛋鸡死亡率可达 60%，肉鸡的淘汰率则达 10%。因为它危害严重，促使美国政府于 1939 年建立专门研究机构。我国经过 20多年的疫苗免疫接种，虽不是100%有效，但此病已不再是一个严重问题。近年，特别是南方个别黄羽种鸡企业和北方的个别蛋种鸡企业，在雏鸡出壳后注射马立克疫苗时由双针注射改为单针注射或直接朝疫苗内兑进抗生素，影响了疫苗的免疫效果，造成鸡群部分免疫失败，降低了疫苗的实际效果。
1、发病情况
从 2015 年 6～7 份开始，北方某省饲养海兰灰父母代近30 万套的种鸡场，连续多批种鸡养到 130 天左右发生鸡冠基部高度肿胀且渐进性消瘦的疫病。发病率和死淘率在 10%～20%，平均＞11%。出现消瘦鸡可持续到 300 多天。临床上没有见到 MD 典型的一条腿前伸，而另一条腿后伸的“大劈叉”症状；也没有看到除鸡冠基部肿胀外的其他皮肤、眼睛的症状。凡有外观症状的消瘦鸡，肝脏、脾脏、卵巢和肾脏等内脏器官呈现严重的肿瘤病变；解剖也没有发现外周神经系统的病变，即单侧坐骨神经的肿大。由于发病较晚（130 天左右开始）和持续时间较长，曾怀疑是禽白血病（ALV）。
该种禽企业是国内某祖代种禽企业的代养种鸡场，父母代源自该祖代鸡场。父母代种引进后，以合同约定的方式为祖代育种企业提供海兰灰商品代种蛋。祖代种禽企业的父母代、商品代用的是某知名外企的同一品规的马立克氏病火鸡疱疹病毒活疫苗。在 2015 年之前无论父母代还是商品代从来没有发生过此类问题，期间也从来没有更换过疫苗。尽管该父母代鸡场出现肿瘤问题（也有其他较小的父母代代养场出现类似的情况），但回收的该种鸡场的种蛋，及其他代养企业的种蛋孵化的商品代均没有发生任何肿瘤疫病。祖代种禽企业也较困惑。
由于与上游祖代种禽企业之间微妙关系的特殊性，祖代种禽场利益没有受到实质危害，问题的具体原因没有及时找到，以及祖代场为了自身利益而推诿等原因，问题长时间没有得到有效解决。
2、外送实验室诊断
取发病的活鸡和病料多批次送到青岛、泰安和北京某科研机构进行实验室检测检验，排除了禽白血病等几种肿瘤疫病，并确诊为马立克氏病。
3、疫苗企业的检测检验
为上游祖代种禽公司提供马立克氏病疫苗的外企技术人员为了澄清自身问题，参与了该种鸡场肿瘤疫病的临床及实验室诊断工作。
（1）疫苗企业提取祖代鸡场正在使用的疫苗进行多次检测，没有发现质量问题。
（2）鸡的攻毒保护试验：由于关乎声誉和企业利益，疫苗企业使用从祖代企业提取的疫苗和生产流通的疫苗，利用从该海兰灰种鸡场分离的马立克氏病病毒进行供毒保护试验，证明疫苗免疫确切有效。
4、诊断结果
经过祖代鸡场技术人员、疫苗企业技术人员和科研机构长时间的共同努力，2016 年 7月份找出了问题的原因：祖代种禽企业给父母代注射马立克疫苗时，改变 2015 年以前的双管双针注射的方式（马立克氏病疫苗和药物分别注射）为现在的双管单针注射后（马立克氏病疫苗和药物通过不同的瓶子汇聚到一个针头注射体内或二者混合后注射），造成马立克氏病疫苗部分失活。
5、问题分析
（1）为什么该种鸡场父母代发生问题而祖代鸡场回收种蛋孵化的商品代没有发生马立克疫病，其中要注意两个问题。其一不知是出于何种原因，该祖代种禽企业把原来的双管双针注射，改为了现在的双管单针注射；其二由于父母代比较贵重，祖代种禽企业使用了某种名贵抗菌药进行注射，药物的酸碱度及不清楚的相互作用等原因造成了马立克疫苗的部分失活。而商品代却没有使用药物注射，躲过了药物对马立克氏病疫苗的破坏。至于上游祖代育种企业到底使用了什么药物，剂量多少，由于涉及商业秘密而无从得知。
（2）为什么该父母代种鸡场发生的马立克氏病与我们以往见到的差异较大。MD 常见于 3～4 周的鸡，以 2～3 月龄发病较为严重。从理论上 1～18 周的鸡任何时间都可能发病。由于药物对马立克氏病疫苗可能仅造成了部分失活，但还有一定作用，这就延缓了发病时间，也掩盖了外在的皮肤病变和神经系统病变等症状和病理变化。加上 MD 本身就非常复杂，肿瘤和炎症之间相互作用表现出几十种的临床症状，每种症状又可以随宿主的遗传特性而不同，病理变化又是由几个不同的病理学综合征组成的。所以皮肤除鸡冠基部肿胀外没有其他的变化，也没有眼睛的变化和明显神经症状及 MD 典型的大劈叉症状。
（3）马立克氏病的防控任重而道远。马立克氏病疫苗防控马立克氏病是兽医学上成功控制疫病的奇迹，也是能有效防治癌症的第一个疫苗。但由于马立克氏病病毒本身的特性和传播形式（该病毒是以一种游离细胞且具有完全感染性的形式从毛囊中排出），这种特性为该病的高度接触传染性提供了一个解释。病毒在鸡舍的环境中稳定，而呼吸系统接触灰尘或羽屑，可能引起该病的自然传播。感染鸡的皮屑、垫料及羽毛具有感染性，推测其含有羽毛囊上皮产生的结合有细胞碎屑的细胞游离性病毒。这些物质室温 4～18 个月和 4℃至少 10 年内仍有感染性，所以我们对于该病的防控绝不能掉以轻心。在做好生物安全的基础上，种禽企业应选择有效的疫苗，且疫苗最好不要混合任何药物，特别是对马立克氏病疫苗稀释液 pH 值影响较大的药物。如必须使用也建议分开注射。
作者：赵君和 （以色列维奥兰羽生物科技（北京）有限公司技术部，北京 100107）
责任编辑：李斐
