1、试验背景及目的
华北某蛋种鸡场连续多批次种鸡在产蛋期间发生不明原因产蛋波动，蛋壳质量变差，如一定比例的软壳蛋。抗体检测结果显示 ND、H9 抗体水平及均匀度在正常范围，而 IB 抗体离散度较大，且抗体数值高于 20 000 占有一定比例，怀疑可能是产蛋期间感染传支野毒所致 [1] 。为了了解免疫不同厂家传支灭活疫苗后的抗体水平及产蛋情况，本试验选择该公司 2 栋鸡舍未开产种鸡分别免疫南京梅里亚高力优 302 产品与某国产新支减灭活疫苗，进行 IB 抗体检测分析及产蛋率评估。
2、试验材料和方法
2.1 试验材料
2.1.1 试验疫苗
高力优 302 灭活疫苗由南京梅里亚动物保健有限公司提供，国产新支减疫苗由客户养殖场自行购买于国内某知名动保企业。
2.1.2 试验鸡
来源于同一批祖代种鸡所产的 2 栋鸡舍（每栋 10 000 只鸡）父母代蛋种鸡，2 栋鸡舍的鸡均饲养在全自动 4 层笼养设备中并执行统一的饲养管理。
2.1.3 IB 抗体检测
采用美国 IDEXX 公司试剂盒，样品送中国农业大学畜禽疫病诊断中心进行检测。
2.2 试验方法
2.2.1 分组及免疫
2 栋鸡舍随机编号为 1#、2#，其中 1# 鸡舍为试验组，2# 鸡舍为对照组。前期均按照客户免疫程序正常进行免疫，试验组和对照组于109 日龄每羽分别左侧胸肌注射 1 羽份的南京梅里亚及某国产新支减灭活疫苗。
2.2.2 采血及检测
分别于免疫当天、免疫后 30 d、45 d 和 60 d随机对试验组和对照组鸡群各采集血清 30 份，送样至中国农业大学畜禽疾病诊断中心检测IB 抗体，结果经统计学方法进行差异化分析。
2.2.3 记录试验观察期
即 109～169 日龄 2 组鸡群总的死淘鸡数和产蛋数，分析经济效益。
3、结果分析
由于种鸡来源、前期免疫程序及饲养管理相同，测得免疫当天也即 109 日龄 2 栋鸡舍 IB抗体水平基本相同，因此以大群平均抗体水平统计。检测结果显示（表 1）：免疫前整个大群 IB平均 ELISA 抗体滴度为 2 275，变异系数为73%；免疫后 30 d 试验组 1# 鸡舍 IB 抗体平均滴度为 11 637，变异系数 52%，抗体水平有明显提升；免疫后 30 d 对照组 2# 鸡舍 IB 抗体平均滴度为 2 733，变异系数 81%，抗体上升较少。试验组 IB 抗体水平远远高于对照组，差异极显著（P<0.01）。
免疫后 45 d 试验组鸡群 IB 平均 ELISA 抗体滴度为 7 369，变异系数 53%；对照组鸡群 IB平均 ELISA 抗体滴度为 1 816，变异系数 68%，试验组和对照组抗体水平差异极显著（P<0.01）。
免疫后 60 d 试验组鸡群 IB 平均 ELISA 抗体滴度为 5 624，变异系数 72%；对照组鸡群 IB平均 ELISA 抗体滴度为 2 190，变异系数139%，离散度较大，试验组和对照组抗体水平差异极显著（P<0.01）。
从抗体变化曲线（图 1）可以看出：免疫后30 d 试验组鸡群 IB 抗体水平较免疫前有大幅度提升，而对照组鸡群抗体水平上升有限，排除免疫操作的问题，需要关注 IB 灭活疫苗的质量；免疫后 45 d、60 d 的检测结果显示 IB 抗体水平有一定程度的下降，这是由于鸡群进入产蛋高峰部分抗体进入种蛋以及活疫苗免疫后的部分中和作用所致 [3] 。免疫后 30 d、45 d 和 60 d的 IB 平均抗体滴度及均匀度方面试验组较对照组都具有明显优势。
生产数据结果表明（见表 2），试验组鸡群死淘数低于对照组，产蛋数量多于对照组，观察期平均每只入舍母鸡多产近 3.7 枚种蛋，以种蛋平均 1 元 / 枚计算，实验组多产生 36 799 元收入，生产成绩和经济效益优势十分明显。
4、讨论
在加强饲养管理、做好鸡场生物安全措施的基础上，当前我国主要采用疫苗免疫接种来预防和控制鸡的传染性支气管炎。由于传染性支气管炎病毒血清型众多，不同血清型之间缺乏有效的交叉保护，加上不合理的免疫程序及疫苗选择，免疫失败的现象时有发生 [4,5] 。
传支疫苗分为活疫苗和灭活疫苗两种。目前国内针对产蛋鸡的传支防控推荐的免疫程序是：1 日龄孵化场选用经典 M 株 H120+ 本土4/91 类疫苗 NNA 株进行喷雾免疫，7～10 日龄NNA 株喷雾 / 点眼免疫并配合半头份油苗注射免疫，开产前 30 d 传支油苗加强免疫，其他时间不定期活苗免疫；种鸡在产蛋中期 40 周龄左右注射传支油苗进行补强免疫，以提供鸡群在产蛋后期对传支野毒感染的保护，同时为下一代雏鸡提供足够的母源抗体。
IB 活苗免疫后主要产生局部黏膜抗体，以提供对鸡群呼吸道的局部免疫保护，而 IB 灭活疫苗免疫后主要产生体液抗体以提供对鸡群内脏器官的保护 [6] 。对于产蛋鸡来说，感染 IB 野毒通常会导致蛋的数量和蛋的品质下降，严重时可见到输卵管沉积旧蛋样物质，同时导致死淘增加，给养殖场带来较大经济损失。本次试验组鸡群免疫后 IB 抗体快速升高，抗体滴度及均匀度都较好，显示南京梅里亚 302 传支灭活疫苗抗原含量高，免疫效果确实。表 2 显示试验期间试验组鸡群入舍母鸡产蛋总数高于对照组，结合过去的产蛋量波动和 IB 抗体检测结果高于20 000 甚至达到 30 000 的事实，推测过去鸡群由于抗体滴度较低而导致传支野毒感染 [4] 。
传支的防控问题目前是一个世界性的难题，关键是要保证鸡群良好的饲养管理、严格的生物安全措施、合理的免疫程序同时选择优质的疫苗，只有同时做好这几方面的工作，才能最大限度地避免或减少发病带来的损失。
5、小结
本次试验结果提示我们：传支灭活疫苗的免疫除了要关注免疫操作外，还要关注疫苗本身的质量，选择抗原含量高、剂量小、免疫应激小的优质疫苗免疫后能刺激鸡群产生更高水平的循环抗体，这对鸡群传支的防控具有重要意义。
参考文献
[1] 甘孟侯.中国禽病学[M].北京：中国农业出版社，1999，43-51.
[2] 连京华，秦卓明，黄波.鸡传染性支气管炎研究进展[J]. 山东农业科学, 2000，1.
[3] 舒黛廉, 赵余放, 杨增歧, 等. 不同种类 IB 疫苗免疫鸡抗体消长规律的测定 [J]. 中兽医学杂志, 2003 (2): 4-8.
[4] 陈宝秋，曹静.商品蛋鸡免疫程序的制定要点[J].家禽科学，2005，1：65-68.
[5] 孙海龙，丁晓勇，赵建伟，等.鸡场免疫程序的合理制定[J].河南畜牧兽医：综合版，2010 (007)：35-36.
[6] 霍清合，吴金玲.传染性支气管炎早期保护的重要性[J].家禽科学，2012 (10)：30-32.
作者：蒲兴,王延新(勃林格殷格翰动物保健单元，上海 200031)
责任编辑：曹伟胜
